Né en 1969 à Toulouse (Haute-Garonne), Louis Aliot y effectue ses études supérieures et obtient un DEA en sciences politiques en 1997, puis un doctorat en droit public en 2002. De 1998 à 2005, il est chargé d’enseignement à l’université de Toulouse I en droit public, et devient, en 2010, avocat au barreau de Paris. Elu conseiller régional de Midi-Pyrénées, il fait son entrée en politique en 1998. Il quitte ses fonctions en 2010, pour devenir conseiller régional de Languedoc-Roussillon. Après avoir été brièvement directeur du cabinet de Jean-Marie Le Pen en 1999, il est nommé coordinateur de campagne de ce dernier pour les présidentielles de 2002.
Lors du congrès de Tours de janvier 2011, il arrive en tête du vote des adhérents à l’élection du comité central du Front National, et devient alors vice-président du parti. Dans le cadre des élections présidentielles de 2012, il est nommé directeur opérationnel de la campagne de Marine Le Pen, et l’un de ses cinq porte-paroles.
Il est ensuite élu député européen dans la circonscription Sud-Ouest aux élections européennes de 2014, avant d’être désigné pour conduire la liste Front National dans la région Languedoc-Roussillon-Midi-Pyrénées.